privind criteriile de testare a pasarilor pentru tăiere ce provin dintr-o zona de supraveghere a bolii de Newcastle, în aplicarea art. 5 alin. (3) din Norma sanitară veterinara privind condițiile de sănătate animala care reglementează comerțul României cu statele membre ale Uniunii Europene și importul din tari terțe de carne proaspăta de pasare, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 391/2002
Pentru aplicarea art. 5 alin. (3) din Norma sanitară veterinara privind condițiile de sănătate animala care reglementează comerțul României cu statele membre ale Uniunii Europene și importul din tari terțe de carne proaspăta de pasare, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 391/2002, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 739 din 9 octombrie 2002, prelevarea de probe și testarea virusologica pentru detectarea virusului bolii de Newcastle trebuie să se efectueze în conformitate cu prevederile din anexa.
(1) Autoritatea veterinara centrala a României poate adopta acte legislative sau prevederi administrative suplimentare necesare prezentei norme sanitare veterinare, pentru a se asigura implementarea și conformitatea cu prevederile acesteia.
(2) Autoritatea veterinara centrala a României, prin Ministerul Agriculturii, Alimentației și Pădurilor, va lua măsurile administrative și penale adecvate pentru a pedepsi orice încălcare a prevederilor prezentei norme sanitare veterinare.
(3) Atunci când autoritatea veterinara centrala a României adopta cele menționate anterior, trebuie să se facă o referire expresă la prezenta norma sanitară veterinara.
Anexa face parte integrantă din prezenta norma sanitară veterinara.
Anexa 1
la norma sanitară veterinara
-----------------------------
de prelevare și testare virusologica
pentru detectarea virusului bolii de Newcastle
Se vor preleva cel puțin 60 de probe, cuprinzând minimum 30 de tampoane cloacale și 30 de tampoane traheale, de la fiecare efectiv de păsări. Trebuie să fie prelevate probe de la cel puțin 60 de păsări. Probele se vor preleva cu 5 zile înainte de tăiere și se vor transporta pentru testare la Laboratorul Național de Referința pentru Boala de Newcastle, racite, dar nu inghetate.
Pot fi grupate cel mult 5 probe de același tip. Tampoanele trebuie să fie așezate într-o cantitate suficienta de mediu cu antibiotic, pentru a se asigura imersiunea completa, iar după agitare trebuie să fie lăsate pentru aproximativ doua ore la temperatura ambianta sau perioade mai lungi la temperatura de 4°C și apoi clarificate prin centrifugare (de exemplu, 800-1.000 x g timp de 10 minute).
Un exemplu tipic de tampon cloacal este: 10.000 de unități/ml penicilina, 10 mg/ml streptomicina, 0,25 mg/ml gentamicina și 5.000 de unități/ml micostatin în soluție tamponata de fosfat salin la un pH de 7,2-7,4. Pot fi adăugate 50 mg/ml de oxitetraciclina. Concentrația de antibiotic poate să fie redusă la dilutii în baza 5 pentru tampoanele traheale. Este foarte important ca atunci când se prepara mediul pH-ul să fie verificat și reajustat după adăugarea de antibiotice.
4. Izolarea virusului pe oua embrionate de pasare
Fluidul supernatant clarificat se va inocula în cantități de câte 0,2 ml în cavitatea alantoidiana, fiecare fluid într-un număr minim de 4 oua embrionate de pasare ce au fost incubate timp de 8-11 zile. Ideal ar fi ca aceste oua să fie obținute dintr-un lot de păsări liber de agenți patogeni, iar atunci când aceasta nu se poate practica, se accepta folosirea oualor obținute dintr-un lot ce se prezintă a fi liber de anticorpi produși de prezenta virusului bolii de Newcastle. Ouale inoculate sunt menținute la 37°C și sunt supuse zilnic mirajului. Ouale cu embrioni morți sau pe cale de a muri și toate ouăle rămase 4 zile după inoculare trebuie să fie racite la 4°C, iar lichidele alantoamniotice să fie testate pentru activitatea de hemaglutinare.
Testul va fi evaluat negativ dacă nu este detectata nici un fel de activitate hemaglutinanta și nu este izolat nici un virus. Când se izoleaza virusul bolii de Newcastle, lotul de păsări este evaluat ca un lot suspect de boala și este supus prevederilor Normei sanitare veterinare privind măsurile de profilaxie, supraveghere și combatere a bolii de Newcastle, aprobată prin Ordinul ministrului agriculturii, alimentației și pădurilor nr. 312/2001, publicat în Monitorul Oficial al României, Partea I, nr. 628 din 5 noiembrie 2001. Dacă virusul izolat se dovedește a fi de origine vaccinala, prelevarile de probe și testarile trebuie să se repete.