NORMA SANITARĂ VETERINARA din 7 octombrie 2003

1. Microorganism

1.1. Clasificare, proveniență, morfologie, proprietăți biologice, orice manipulare genetica

1.2. Inocuitate, posibila supravietuire în afară fermentării și eventuale consecințe asupra mediului înconjurător

1.3. Păstrarea caracteristicilor și a puritatii tulpinilor cultivate. Metode folosite pentru a verifica aceste criterii

2. Mediu de cultura și proces de fabricație

2.1. Compozitia substratului, substanțe adăugate etc.

2.2. Procese de fabricație, desicare și de purificare. Proces de inactivare pentru microorganisme. Metode utilizate pentru a verifica constanta compoziției produsului de cultura și detectarea oricărei contaminari chimice, fizice și biologice în timpul producției.

2.3. Procedeu tehnologic de preparare în vederea utilizării

3. Caracteristici ale produsului

3.1. Proprietății fizice și fizico-chimice: structura morfologica micro și macroscopica, mărimea particulei, densitate, greutate specifică, higroscopicitate, solubilitate, proprietăți electrostatice etc.

3.2. Compoziție și caracteristici chimice

3.2.1. Conținut de umiditate, proteina bruta, grasime bruta, celuloza bruta, cenusa bruta, carbohidrati. Limite ale variației acestor parametri

3.2.2. Conținut total de amoniu, amida, azot din nitriti și nitrati, acizi nucleici, proteine. Compoziție calitativă și cantitativă a aminoacizilor totali și liberi, precum și a bazelor purinice și pirimidinice

3.2.3. Compoziție calitativă și cantitativă a lipidelor totale: acizi grasi, materie nesaponificabila, pigmenti lipidici solubili, fosfolipide

3.2.4. Compozitia fracțiunii de carbohidrati

3.2.5. Compoziție calitativă și cantitativă a componentelor anorganice

3.2.6. Compoziție calitativă și cantitativă a vitaminelor

3.2.7. Compoziție calitativă și cantitativă a celorlalți constituenti: aditivi, reziduuri de substrat și solventi, alte reziduuri potențial dăunătoare metabolismului substratului, mediului de cultura și procesului de fabricație

3.3. Contaminare microbiologica a produsului

3.4. Comportamentul și stabilitatea produsului, ca atare și atunci când este amestecat cu furaje pentru utilizare curenta sau în timpul depozitarii

4. Prezentare și condiții de utilizare

4.1. Denumirea propusă pentru comercializarea produsului

4.2. Compozitia propusă pentru comercializarea produsului

4.3. Utilizarea produsului pentru nutriție animala pe specii. Concentratii stabilite pentru furajele complete și pentru cantități stabilite în ratiile zilnice pentru specia de animale în cauza

5. Metode de determinare

Metode calitative și cantitative pentru determinarea produsului în furaje complete și în furaje complementare. Descrierea acestor metode trebuie însoțită de informații legate de specificitate, sensibilitate, limite de detectie, limita de eroare, posibile interferente cu alte substanțe. Probe din diferitele forme de prezentare a produsului în cauza trebuie să fie puse la dispoziție.

1. Evaluarea valorii proteice

1.1. Studii chimice, biochimice și microbiologice

1.2. Studii pe animale de laborator cu produsul supus analizei, comparativ cu proteine de referința

2. Studii pe specii ținta

Următoarele studii trebuie realizate pe fiecare specie ținta în comparatie cu un grup de control ce primește, în aceleași condiții de balanța nutritionala, o dieta pentru utilizare curenta, conținând cantități echivalente de azot proteic, iar pentru rumegatoare, de azot total.

2.1. Proteina și valoare suplimentară de energie a produsului în ratii și pe baza condițiilor propuse de utilizare, în diferite etape fiziologice ale animalelor (de exemplu, perioada de creștere, gestatie, parturitie)

2.2. Influența produsului în condițiile propuse de utilizare asupra sporului, a ratei de conversie a furajelor, a morbiditatii și mortalitatii

2.3. Niveluri nutritionale optime de încorporare a produsului în ratii

2.4. Efectul produsului în condițiile de utilizare propuse asupra calităților tehnologice, organoleptice sau asupra altor calități ale produselor comestibile de origine animala

3. Condiții experimentale de realizare a studiilor pe speciile ținta

Se prezintă o descriere detaliată a testelor efectuate și se oferă următoarele date:

3.1. Specia, rasa, vârsta și sexul animalelor, procedura de identificare

3.2. Numărul grupelor de testare și control; numărul de animale pentru fiecare grup (numărul trebuie să fie destul de mare pentru o analiza statistica, folosindu-se parametrii statistici potriviti)

3.3. Nivelurile de încorporare a produsului, compozitia calitativă și cantitativă a ratiei și analiza acesteia

3.4. Locația fiecărui experiment, condiția fiziologica și condițiile de sănătate animala, condițiile de creștere

3.5. Durata exactă a testarii și data analizelor efectuate

3.6. Efecte adverse ce au avut loc în timpul experimentarii și în momentul apariției acestora.

Studiile prezentate în aceasta secțiune au ca scop evaluarea siguranței utilizării produsului la speciile ținta și riscurile pentru om și mediu, ce pot rezultă direct sau indirect din aceasta utilizare. Studiile toxicologice solicitate în acest scop depind de natura produsului, de speciile animale în cauza și de metabolizarea produsului la animale de laborator.

1. Studii asupra speciilor ținta

Următoarele studii trebuie efectuate pe fiecare specie ținta, în comparatie cu un grup de control care primește, în aceleași condiții de balanța nutritionala, o dieta pentru utilizare curenta care conține cantități echivalente de azot proteic, și pentru rumegatoare, de azot total.

1.1. Rate maxime de încorporare a produsului în ratia zilnica fără a produce vreun efect advers

1.2. Posibil efect al produsului asupra fertilitatii și reproductiei, dacă este necesar

1.3. Efecte ale ingestiei produsului, în condițiile propuse de utilizare, asupra microorganismelor florei tractului digestiv și asupra colonizarii tractului digestiv cu agenți patogeni

1.4. Determinarea, în condițiile propuse de utilizare, a unor posibile reziduuri ale produsului (substrat, mediu de cultura, solventi, contaminanti) în produse comestibile de origine animala

1.5. Determinarea, în condițiile propuse de utilizare, a unor posibile reziduuri ale produsului (substrat, mediu de cultura, solventi, contaminanti) în secretii și excretii

2. Studii pe animale de laborator

2.1. Metabolism

Transformările produsului suferite în organismul animal: absorbție, acumulare, biotransformare, eliminare

2.2. Mutagenitate

Investigații ale posibilei mutagenitati datorate contaminantilor (în special micotoxine și bacterii) sau reziduurilor produsului (substrat, mediu de cultura, solventi), incluzând teste de screening în vitro și utilizând sisteme de activare metabolica

2.3. Studii toxicologice

Următoarele studii trebuie efectuate în comparatie cu grupuri de control ce primesc, în aceleași condiții de balanța nutritionala, o dieta pentru utilizare curenta ce conține cantități echivalente de azot proteic. Trebuie investigate efectele toxice pentru a depista cauza și mecanismele acestora și pentru a stabili, dacă acestea sunt rezultatul unui dezechilibru nutritional sau al unei supradoze a acestui produs în dieta.

2.3.1. Toxicitate subcronica

Aceste studii trebuie efectuate pe doua specii de animale, dintre care una de rozatoare. Produsul trebuie administrat în ratia zilnica la cel puțin două doze de încorporare. Acestea ar trebui alese astfel încât să se determine, pe cat posibil, o doza fără efecte adverse și o doza care să prezinte unele efecte adverse. Loturile de animale trebuie să fie formate dintr-un număr adecvat de subiecti din fiecare sex. Un lot martor trebuie întotdeauna inclus. Toate datele biologice relevante trebuie înregistrate la intervale corespunzătoare, în special date privind sporul, consumul de furaj, hematologie, analiza urinei, parametrii biochimici, mortalitate, greutatea organelor, morfopatologie și histopatologie ale principalelor organe și tesuturi. Rezultatele trebuie prezentate în detaliu și trebuie să includă, pe cat posibil, o evaluare statistica.

2.3.2. Toxicitate cronica

În general, studiile de toxicitate cronica trebuie efectuate pe doua specii de animale, dintre care una de rozatoare. Produsul trebuie administrat în ratia zilnica, în cel puțin două doze de încorporare. Experimentele trebuie să se extindă pentru cel puțin 2 ani la sobolan sau 80 de săptămâni la soareci. Loturile de animale trebuie să fie formate dintr-un număr adecvat de subiecti pentru fiecare sex. Un lot martor trebuie întotdeauna inclus.

2.3.3. Carcinogenitate

Pentru evaluarea carcinogenitatii trebuie acordată o atenție deosebită timpului de expunere, carterelor histologice ale oricărei tumori observate și incidentei acestora. Orice efect asupra incidentei tumorilor și/sau incidentei ori evoluției bolilor prin comparatie cu un lot martor trebuie evaluat asa cum se indica la paragraful 2.3. Rezultatele trebuie prezentate în detaliu și trebuie să se includă, pe cat posibil, o evaluare statistica.

2.4. Alte studii

Studiile de reproducție trebuie să se extindă la cel puțin două generații filiale și pot fi combinate cu studii de embriotoxicitate, incluzând studii de teratogenitate. O atenție specială trebuie acordată fertilitatii, fecunditatii și observarii asupra dezvoltării postnatale a fetusilor. Poate fi prezentată orice alta metoda capabilă sa producă rezultate masurabile.

2.5. Condiții experimentale pentru studiile efectuate pe animale de laborator. Se oferă o descriere detaliată a testarilor efectuate și se furnizează următoarele date:

2.5.1. Specie, rasa, varietatea și sexul animalelor

2.5.2. Numărul de testări și loturi experimentale, numărul de animale din fiecare lot; numărul trebuie să fie destul de mare pentru o analiza statistica, folosindu-se parametrii statistici corespunzatori.

2.5.3. Rate de încorporare a produsului, compoziție calitativă și cantitativă a ratiei și analiza acesteia

2.5.4. Condiții generale de creștere în timpul perioadei de testare

2.5.5. Durata exactă a testarii și data examinarilor efectuate

2.5.6. Rata și timpul mortalitatii pentru diferitele loturi de testare

2.5.7. Simptome clinice și modificări patologice ce au avut loc în timpul experimentului și în momentul apariției acestora

3. Studii privind mediul

În funcție de natura posibilelor reziduuri ale produsului - substrat, mediu de cultura, solventi, contaminanti -, în secretiile și excretiile speciilor ținta pot fi solicitate date despre evoluția acestor reziduuri în balegar, în sol și în apa și, de asemenea, efectele acestora asupra biologiei pământului, creșterii plantelor și a vieții acvatice.

În funcție de natura și de condițiile de utilizare ale produsului, pot fi solicitate date despre posibilele efecte alergice, iritatii ale pielii și ale membranelor mucoasei oculare, tractului respirator sau digestiv, pentru a se evalua eventualele riscuri în timpul manipulării produsului și pentru prevenirea acestora.

--------------